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酶免法(酶免法檢測(cè)排除艾滋病準(zhǔn)確嗎)

2021-08-16 16:47:42 作者:sn_xy 1669人瀏覽
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酶免法(酶免法檢測(cè)排除艾滋病準(zhǔn)確嗎)?艾滋病傳播途徑多,潛伏期長(zhǎng),做好HIV抗體檢測(cè)是早發(fā)現(xiàn)、早治療的重要方法。目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要是HIV病毒抗體檢測(cè),比較通行的檢測(cè)方法主要有三種:酶聯(lián)法、快速法、蛋白免疫印跡法,下面,小編就來和大家分別介紹這些方法的操作流程吧。

酶聯(lián)法:酶聯(lián)法也被稱為“酶聯(lián)免疫法”,英文簡(jiǎn)稱ELISA,這是一種醫(yī)學(xué)上常用的檢測(cè)方法。簡(jiǎn)單來說,它是用血清來檢測(cè),讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合,然后通過顯色來判斷結(jié)果。

該檢查方法的主要需要經(jīng)過以下四大步驟:

1、對(duì)被檢測(cè)者進(jìn)行血液采樣。

2、采樣的血液需要靜置至少半個(gè)小時(shí)之后自然凝集,然后取血清。

3、將酶復(fù)合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽(yáng)性對(duì)照,還有質(zhì)控品。

4、經(jīng)過一個(gè)小時(shí)的孵育之后洗板,加底物,半個(gè)小時(shí)避光反應(yīng)后加終止液即完成反應(yīng)部分,然后讀數(shù)。由數(shù)值來判斷結(jié)果的陰性或陽(yáng)性。

當(dāng)然,以上步驟都需要專業(yè)醫(yī)生在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。通過以上檢測(cè),如果發(fā)現(xiàn)被檢測(cè)者的檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的話,實(shí)驗(yàn)室將會(huì)按照CDC的HIV操作規(guī)程再進(jìn)行第二次檢測(cè),第二次的方法又與第一次的方法不同,這里就不再贅述。若檢測(cè)結(jié)果還是陽(yáng)性,血清樣本將送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。

蛋白免疫印跡法:蛋白免疫印跡法是艾滋病確診實(shí)驗(yàn)室常用的方法,主要用于確認(rèn)試驗(yàn)。一般情況下,如果通過酶聯(lián)免疫法發(fā)現(xiàn)被檢查者呈陽(yáng)性時(shí),需采用此方法進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。這也是廣泛用于許多傳染病診斷的實(shí)驗(yàn)方法。

從醫(yī)學(xué)上來看,蛋白免疫印跡法的基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過SDS-PAGE電泳,將分子量大小不等的蛋白帶分離開來,然后再把這些已經(jīng)分離的不同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。在具體操作中,該方法可分為以下三步:

1、將硝酸纖維素膜切割成條狀,每一條硝酸纖維素膜上均含有經(jīng)電泳分離過的HIV病毒抗原。

2、將待檢血清樣品用稀釋液稀釋成1/100,再把它直接加到硝酸纖維素膜上,恒溫震蕩,使其充分接觸反應(yīng)。

3、檢驗(yàn)結(jié)果。血清中若含有HIV抗體,就會(huì)與膜條上的抗原帶相結(jié)合。加入抗人IgG酶結(jié)合物和底物后,即可使有反應(yīng)的抗原抗體結(jié)合帶呈現(xiàn)紫褐色,根據(jù)出現(xiàn)條帶情況判定結(jié)果。

艾滋病試紙檢測(cè)法:艾滋病試紙檢測(cè)法,又稱“金標(biāo)法”,也叫“膠體金法”。其原理是使用膠體金免疫層析科技研發(fā)的新一代檢測(cè)試,可檢測(cè)血清或血漿標(biāo)本中的HIV-1/2特有性抗體。這是目前國(guó)際上較為先進(jìn)的靈敏,特異,快速,簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確率高的體外診斷方法。這類試紙主要分兩種,一種是血檢試紙,一種是唾液試紙。血檢試紙的種類比較多,在醫(yī)院和大型藥店基本都可以買到,唾液檢測(cè)試紙目前只有美國(guó)艾威爾的的唾液檢測(cè)試紙,售賣網(wǎng)點(diǎn)相對(duì)較少。

現(xiàn)在來說說血檢試紙的使用方法。該方法可以在家里自己檢測(cè),操作簡(jiǎn)單方便,不需要特殊的儀器。在艾滋病試紙上先滴兩滴血,再滴一滴稀釋液,然后等待15分鐘就可以讀取結(jié)果。在結(jié)果判讀時(shí),如果試紙上出現(xiàn)一條紅色的直線,說明是陰性,如果是兩條紅線,就是陽(yáng)性。如果檢測(cè)出現(xiàn)陽(yáng)性,按照HIV檢測(cè)流程,需要進(jìn)行復(fù)測(cè)。目前,這類試紙單次檢測(cè)的準(zhǔn)確率都在97%以上,如果2次或多次檢測(cè)結(jié)果相同的話,則可以認(rèn)為檢測(cè)結(jié)果100%準(zhǔn)確。


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