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精子分離技術(shù)運(yùn)用

2012-05-14 10:51:14 作者:redadmin IVF試管懷孕嬰兒 866人瀏覽

從1973年起,正式引用于人體,其方法為將精液與生理性液體混合,經(jīng)低速離心處理,添加百分之五至二十不同濃度之人血清白蛋白之弱堿液,令精子在試管內(nèi)自由游動(dòng),以雄性精子之游動(dòng)較快,在適當(dāng)濃度的溶液中,只能讓大部份正?;顒?dòng)力強(qiáng)的雄性精子游過(guò),而阻擋雌性精子及不正常形狀或活動(dòng)力差的精子,在一定時(shí)間內(nèi)截取含充裕雄性精子的溶液部份,經(jīng)洗滌及懸浮處理,于排卵日之周近施行人工受精。

  

  胚胎切片鑒定法

  

  胚胎切片鑒定法。先取出精子及卵子,體外受精后,待胚胎發(fā)育至適合切片時(shí),再將胚的透明帶切開(kāi),取出數(shù)個(gè)細(xì)胞鑒別胚胎性別,再選所要的性別的胚胎,植入孕母動(dòng)物子宮內(nèi)發(fā)育。這樣也可以控制子代性別,而鑒別胚胎細(xì)胞性別的方法有二類:一是以熒光原位雜交染色法(FISH)判定胚胎細(xì)胞性染色體的 組合。二是以聚合醞鏈反應(yīng)法(PCR),放大并分析胚胎細(xì)胞性染色體上的特定序列,來(lái)判定性別。這二種方法因動(dòng)物種類不同而有不同的適用度。

  

  人工協(xié)助生殖技術(shù)

  

  人工協(xié)助生殖技術(shù)(ART)中可幫助生男生女的方法與前面講的畜牧繁殖所用的類似。簡(jiǎn)言之,即精子分離術(shù)加上人工授精或胚胎切片及胚細(xì)胞性染色體鑒定后選擇性植入。   同時(shí)血清白蛋白液也其有將活動(dòng)力弱、較不健全或畸形的如雙頭雙尾小頭等不正常精子予以過(guò)濾,只留下活動(dòng)力強(qiáng)、形狀單一的正常精子予以人工受精,因此對(duì)精子過(guò)少或品質(zhì)不佳的男性不孕癥者,常能改進(jìn)至正常的濃度;經(jīng)過(guò)此精子分離法聚集外型單一正常又活動(dòng)力強(qiáng)的精子,因此只需微量的精液就能達(dá)到懷孕的目的。

  

  白蛋白分離精子

  

  后70年代的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),以白蛋白來(lái)分離精子,可以達(dá)到80%之成功率。這主要是利用X精子與Y精子比重不同所致,然而在人的研究方面卻是70%不到,顯示 性別的選擇在人體方面的因素似乎較為復(fù)雜。除了用白蛋白來(lái)分離之外,較常用的試劑如percoll試劑,結(jié)果也是60-70%左右,并未如大家所希望的能夠到達(dá)80%以上。

  

  percoll試劑

  

  在男性病患以自慰的方式將精液取出之后,先將精液液化,約需30分鐘。液化之后,將精液置于3㏄之pecoll試劑之上層,而后置于離心機(jī)中,以 1800rpm離心約15分鐘,將上清液棄置,加上3㏄之含10%血清之HTF再以1000rpm離心10分鐘,再將上清液移除,重復(fù)上一個(gè)步驟,最后將沉淀于試管底部之精子加入含有10%血清之HTF,混合之后即可使用。